면역 실험

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면역 실험

면역 실험
밀배아추출물
면역 실험 및 평가자료
-임상평가 분석
7. DMBQ함량 측정
연구목적

기능성(면역)식품 개발을 위하여 밀배아를 사용하여 각기 다른 방법으로 추출된 밀배아 추출물(용매추출 - Chloroform / Ethyl Acetate, 1차, 2차 초임계추출, 1차, 2차 초임계박추출) 내의 2,6-Dimethoxy-1,4-benzoquinone (DMBQ) 함량 비교분석을 하였음.

연구결과

초임계추출공정을 통해 제조되는 두가지 원료 (용출용매분획, 초임계박추출물)의 각각의 Batch별 추출수율 및 DMBQ 함량을 분석한 결과, 초임계 용출용매분획의 경우 탁도 및 점도가 우수하나 DMBQ 함량은 낮았으며 초임계박추출물의 경우 추출수율은 낮았으나 DMBQ 의 함량은 상대적으로 높은 것을 알 수 있었음. 이들 두 소재원료의 경우 향후 사용목적에 따라 선택적으로 응용되도록 사업화를 할 수 있을 것으로 사료됨.

8. 세포독성 실험결과
연구목적

RAW264.7(대식세포) 세포를 이용하여 밀배아추출물의 세포독성을 확인하기 위해 실시함 RAW264.7 세포는 in vitro실험에서 대식세포로 사용됨. 대식세포는 선천면역반응에 관여하는 세포로 LPS 등으로 자극한 후 분비되는 NO 및 cytokine 생성을 측정하여 소재의 면역 활성을 측정하여 시험을 수행함.

연구결과

배아분말 추출물과 초임계추출물 각각의 농도별 독성 측정 결과 농도간에 유의적이 차이를 보이지 않음
추출물 간 유의적인 독성의 차이를 보이지 않음.

9. 밀배아추출물의 Nitric Oxide 결과
연구목적

밀배아 추출물을 이용한 면역개선 기능성원료의 효능검증
(NO 는 대식세포의 iNOS 효소의 작용에 의하여 생성되는 것으로 Griess reagenet 를 이용하여 흡광도 측정)

연구결과

밀배아 추출물과 홍삼추출물을 비교한 결과 농도에 비례하여 NO 생성량이 유의하게 증가됨을 나타내며 일정농도 이상일 경우 홍삼과 동일한 결과를 나타냄. 이를 통하여 NO 면역실험 지표에 유의한 결과를 얻었음.

10. Western blot 실험 결과
연구목적

밀배아 추출물을 이용한 면역개선 기능성원료의 효능검증
iNOS, COX2(활성화된 대식세포에 LPS를 단독, 후보 소재와 동시에 처리함으로써 Western blot, qPCR을 통해 발현정도를 확인)

연구결과

밀배아 추출물과 홍삼추출물을 비교한 결과 농도에 비례하여 iNOS, COX2 생성량이 유의하게 증가됨을 나타내며 이를 통하여 iNOS, COX2 의 면역지표에 유의한 결과를 얻었음.

-동물실험
11. In-vivo 경구투여에 의한 면역개선능력 평가
실험동물

I 군: 정상대조군-NC 군
II 군: Negative Control -Cycophosphamide처리 (CY 군)
III 군: 홍삼처리군 (GS 군)
IV 군: 밀배아 발효추출군 (WW 군)
V 군: 밀배아용매추출군 (WE 군)

실험내역

생채 내에서 동물을 대상으로 특정 물질이나 약물을 경구로 투여하였을 때 면역 시스템에 미치는 영향이나 개선 능력을 평가하기 위한 실험

12. Natural killer (NK) 세포 활성 측정
연구목적

NK 세포가 얼마나 효과적으로 감염된 세포나 암세포들을 인식하고 파괴하는지를 평가함.
결과적으로 NK 세포 활성을 증진시키는 면역 효과를 평가하기 위해 NK 세포 활성 측정

연구결과

밀배아추출물은 시판중인 홍삼추출물과 동등한 NK 세포활성촉진 효과를 가지고 있고, ANOVA 테스트의 결과로 볼 때 섭취용향 증가 시 동등 혹은 그 이상의 유효성을 가지고 있는 것으로 사료됨.

13. 사이토카인 발현 측정
연구목적

면역 체계의 활성화 정도 측정을 통하여 특정 사이토카인의 발현이 면역 체계의 활성화 정도를 나타내는 정도를 나타내고 이는 면역 체계가 얼마나 잘 작동하고 있는지 나타냄.

연구결과

밀배아추출물은 면역과 관련된 체내 면역 세포 증진에 따른 면역력 개선에 효능이 있을 것으로 사료됨.


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